心血管系统疾病论文_小窝在G蛋白偶联雌激素受
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【摘要】文章目录 1 材料与方法 1.1 材料 1.2 细胞培养与分组 1.3 基因敲减方法 1.4 Western blot检测eNOS和p-eNOS及相关蛋白表达 1.5 统计学方法 2 结 果 2.1 不同浓度雌二醇处理后eNOS和p-eNOS蛋白表达 2.
文章目录
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 细胞培养与分组
1.3 基因敲减方法
1.4 Western blot检测eNOS和p-eNOS及相关蛋白表达
1.5 统计学方法
2 结 果
2.1 不同浓度雌二醇处理后eNOS和p-eNOS蛋白表达
2.2 Cav-1基因敲减应用雌激素后相关蛋白的表达
2.3 GPER基因敲减应用雌激素后相关蛋白的表达
3 讨 论
文章摘要:目的探讨小窝(caveolae)对雌激素通过G蛋白偶联雌激素受体(GPER)调控小鼠主动脉内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性的影响。方法当细胞融合度达到80%~90%时,选取内皮细胞分为对照1组、DMSO组、雌二醇1组、雌二醇2组、雌二醇3组(n=5),其中雌二醇1组、雌二醇2组、雌二醇3组按浓度梯度加入雌二醇(10、50、100 nmol/L),对照1组不予任何处理,DMSO组加入50μl DMSO培养。另选取内皮细胞分为对照2组(未作任何处理)、阴性对照1组[加入小窝蛋白1(Cav-1)阴性对照干扰RNA]、Cav-1敲减组(加入Cav-1干扰RNA);选取部分内皮细胞设对照3组(未作任何处理)、阴性对照2组(加入GPER阴性对照干扰RNA)、GPER敲减组(加入GPER干扰RNA)。检测Cav-1、GPER、eNOS、磷酸化eNOS(p-eNOS)蛋白表达。结果与对照1组比较,雌二醇3组p-eNOS蛋白表达明显增加(0.47±0.07 vs 0.20±0.04,P<0.05)。对照2组、阴性对照1组、Cav-1敲减组GPER、eNOS、Cav-1蛋白表达比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与对照2组比较,Cav-1敲减组GPER、eNOS、Cav-1蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。对照3组、阴性对照2组、GPER敲减组eNOS、p-eNOS表达比较,无统计学差异(P>0.05)。与对照3组比较,GPER敲减组GPER蛋白表达明显降低(0.56±0.22 vs 2.40±0.65,P<0.05)。结论小窝参与了雌激素通过GPER调控小鼠主动脉eNOS活性的过程。
文章关键词:
论文分类号:R54
文章来源:《基础医学与临床》 网址: http://www.jcyxylczz.cn/qikandaodu/2021/1011/618.html